Гвидо Агости родился 11 августа 1901 года в Форли, Италия. Учился в Болонье у Ферруччо Бузони, Бруно Муджеллини и Филиппо Ивальди, затем занимался композицией под руководством Джакомо Бенвенути.
Из-за нервных проблем Агости вскоре оставил концертную карьеру и сосредоточился на преподавании. Он работал в консерваториях Венеции, Рима и Милана, Академии Киджи, Высшей школе музыки в Веймаре и Академии Сибелиуса. Среди его учеников были Мария Типо, Урсула Оппенс, Хэмиш Милн, Йонти Соломон, Пэк Кон У и Эммануил Красовский.
В 1967 году Агости возобновил концертные выступления. Он играл в ансамблях с виолончелистом Энрико Майнарди, флейтистом Северино Гаццеллони и Римским квартетом. Записал сонаты Бетховена и прелюдии Дебюсси. В 1934 году переложил для фортепиано несколько номеров из балета Игоря Стравинского «Жар-птица»; в 1935 году для него была написана фортепианная соната Эрнеста Блоха.
Агости был членом Королевской академии в Лондоне. В 1976 году он стал вице-президентом Национальной академии Святой Цецилии в Риме и занимал эту должность до смерти. В 1977 году власти Форли наградили его золотой медалью за вклад в развитие культуры. Он умер 2 июня 1989 года в Милане.